自噬：肝纤维化的作用机制与处理降酶方含药血清对脂诱导的影响

摘要：

文题释义：

肝纤维化：是一种由病毒性脑炎、非乙醇性脂肪肝等多种原因导致的慢性肝外伤，肝细胞被反复破坏久之形成细胞外基质的沉积与异常分布的疾患，其主要模式在于肾脏挫伤后引起肝星状细胞大量活化，活化后的肝星状细胞由原先的静息状态转为迅速增殖状态并大量转换为肌成纤维细胞，取代正常肝细胞，脑部发生实变，形成大量纤维样疤痕，丧失正常功能。 #

激酶：是一种进化上保守的细胞过程，在调节机体能量和营养、维持机体能量代谢中起着至关重要的作用，通过降解溶酶体中损坏的细胞器、异常的蛋白质集聚物和损坏的DNA来维持细胞内稳态。大量研究阐明，端粒在慢性纤维化疾病中表现异常活跃，端粒已被报导在肝纤维化的发生和发展中发挥重要调节作用，肝星状细胞凋亡参与肝纤维化病理进展，抑止肝星状细胞凋亡可减缓肝纤维化进程。

背景：内质网在肝纤维化中发挥重要作用，可以通过诱导肝星状细胞活化推动肝纤维化的进程。前期研究阐明，柔肝降酶方具备保护转氨酶能、抗炎、抗氧化应激反应等作用，其是否通过凋亡抗肝纤维化的作用模式仍未表明。 #

目的：思考柔肝降酶方含药血浆对脂寡糖诱导的人肝星状细胞活化及内质网的影响及其潜在的作用模式。

方式：用脂寡糖确立人肝星状细胞活化模型2023磺酰尿类降糖药的作用机制，分成不同的处理组：①空白组：人肝星状细胞+空白血浆；②模型组：人肝星状细胞+空白血浆+脂甾醇；③柔肝降酶方低、中、高药量含药血浆组：人肝星状细胞+低、中、高药量柔肝降酶方含药血浆+脂甾醇；④柔肝降酶方高药量含药血浆联合雷帕霉素组：高药量组基础上+雷帕霉素；⑤柔肝降酶方高药量含药血浆联合PI3K抑止剂组：高药量组基础上+ #

。CCK-8法观察细胞增殖状况；选用单丹磺酰尸胺染色法观察细胞凋亡状况；Blot检查细胞通路蛋白(PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、人肝星状细胞活化标识蛋白(α-胃壁肌动蛋白、Ⅰ型胶原纤维)抒发水平的影响。

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结果与推论：①柔肝降酶方含药血浆就能增加人肝星状细胞的增殖活性，上调Ⅰ型胶原纤维、α-胃壁肌动蛋白的蛋白抒发，调低激酶P62蛋白的抒发，增加LC3-Ⅱ、-1蛋白的抒发，且展现药量依赖性；②MDC萤光染色结果显示2023磺酰尿类降糖药的作用机制，柔肝降酶方含药血浆可使细胞黑色斑纹萤光硬度增加；③加入激酶兴奋剂雷帕霉素后，P62蛋白抒发增加，LC3-Ⅱ、-1蛋白抒发下降；④经过柔肝降酶方含药血浆处理后，PI3K、Akt、mTOR蛋白乙酸化水平下降，呈药量依赖性，这些作用能被PI3K抑止剂减小；⑤提示柔肝降酶方含药血浆或许通过PI3K/Akt/mTOR讯号通路抑止激酶，提高脂寡糖诱导的人肝星状细胞活化。 #

(陶柏楠) #

美国组织安装工程研究月刊出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；病变干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织安装工程 #

关键词:柔肝降酶方,细胞凋亡,Akt,mTOR,LC3-Ⅱ,人肝星状细胞

引用本文:陶柏楠,王咏兰,江露,张宗星,刘道忠,万星,黄德斌,袁林.柔肝降酶方含药血浆抑止人肝星状细胞的活化及内质网[J].美国组织安装工程研究,2023,27(33):5334-5341.